Was ist die Art des Zellkulturmediums und wie wird es verwendet?
Bei der Tierzellkultur werden relevante Gewebe aus dem Tierkörper entnommen, in einzelne Zellen dispergiert (unter Verwendung von Trypsin oder Kollagenase) und dann in ein geeignetes Kulturmedium gegeben, damit diese Zellen wachsen und sich vermehren können.
Welche Arten von Zellkulturmedien gibt es?
Gemäß der Entwicklungsgeschichte von Zellkulturmedien können Zellkulturmedien grob in mehrere Typen unterteilt werden, wie z. B. ausgewogene Salzlösung, natürliche Zellkulturmedien, synthetische Zellkulturmedien, serumfreie Zellkulturmedien und Zellkulturmedien mit begrenzten chemische Bestandteile.
1. DMEM-Zellkulturmedium
DMEM (Modified Minimal Essential Medium von Dulbecco) wird von Dulbecco auf Basis von MEM-Medium gewonnen. Die Menge jeder Komponente wird verdoppelt und in zwei Arten unterteilt: niedriger Zuckergehalt (1000 mg / l) und hoher Zuckergehalt (4500 mg / l). Die Zellen wachsen schnell. Es ist besser, hohe Glukose zu verwenden, um Tumorzellen mit schlechter Adhäsion und Klonen zu kultivieren, und es wird häufig verwendet, um Myelomzellen von Hybridomen und transformierten Zellen, die mit DNA transfiziert sind, zu kultivieren.
2. Neuronales Basiskulturmedium
Es kann grundlegende Nährstoffe für das Wachstum von Neuronen liefern.
3. Ipl-41-Insektenmedium
Das Ipl-41-Insektenmedium ist für die großflächige Expansion der Spodoptera frugiperda-Zelllinie konzipiert und wird auch häufig für die Proteinexpression durch das Baculovirus-Expressionssystem (BEVS) verwendet. Ipl-41-Medium ist eine Verbesserung der ursprünglichen IPL-Formel. Es wurde von Weiss et al. Aus dem Insektenpathologie-Labor des Landwirtschaftsministeriums der Vereinigten Staaten. Es wurde für die groß angelegte Expansion von Spodoptera-Meodensis-abgeleiteten Zelllinien verwendet. Weiss fügte dem Basismedium fötales Rinderserum und TPB-Medium hinzu und realisierte erfolgreich die groß angelegte kontinuierliche Kultur der ipl-21 AE (III)-Zelllinie.
Das Medium wird hauptsächlich zur Kultivierung und Erhaltung von Lepidoptera-abgeleiteten Zelllinien und zur Amplifikation von Viren dieser Zelllinien verwendet. Ipl-41-Medium wurde auch verwendet, um rekombinantes Baculovirus-Protein in serumfreien Spodoptera-Zellen zu exprimieren.
1.1 ausgewogene Salzlösung (BSS)
BSS besteht hauptsächlich aus anorganischen Salzen und Glucose. Seine Funktion besteht darin, das osmotische Druckgleichgewicht der Zellen aufrechtzuerhalten, die pH-Stabilität aufrechtzuerhalten und eine einfache Ernährung bereitzustellen. Es wird hauptsächlich zum Spülen von Zellen und zum Vorbereiten anderer Reagenzien verwendet.
Als Serum für die Zellkultur wird derzeit hauptsächlich Rinderserum verwendet, einige Spezialzellen werden auch mit Humanserum und Pferdeserum kultiviert. Rinderserum ist für die meisten Säugerzellen geeignet, es ist jedoch nicht ausgeschlossen, dass es besser geeignet ist, bei der Kultivierung bestimmter Zellen anderes Tierserum zu verwenden. Das Serum enthält verschiedene Plasmaproteine, Polypeptide, Fette, Kohlenhydrate, Wachstumsfaktoren, Hormone, anorganische Substanzen usw. Diese Substanzen erreichen ein physiologisches Gleichgewicht bei der Förderung des Zellwachstums oder der Hemmung der Wachstumsaktivität.
1.2 synthetisches Zellkulturmedium
Synthetisches Nährmedium ist eine Art Nährmedium, das entsprechend der Zusammensetzung des natürlichen Nährmediums synthetisiert, künstlich gestaltet und mit chemischen Substanzen aufbereitet wird. Das am frühesten entwickelte Basismedium (MEM) ist im Wesentlichen eine pH-gepufferte isotonische Mischung, die Salz, Aminosäuren, Vitamine und andere essentielle Nährstoffe enthält. Auf dieser Basis wurden DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 und andere synthetische Zellkulturmedien kontinuierlich weiterentwickelt.