Ernährungsbedingungen der Zellkultur
Ernährungsbedingungen der Zellkultur
1. Kulturmedium
Das Zellkulturmedium enthält verschiedene Nährstoffe, die für das Zellwachstum erforderlich sind, darunter Kohlenhydrate, Aminosäuren, anorganische Salze, Vitamine usw. Je nach Ernährungsbedarf verschiedener Zellen stehen verschiedene synthetische Medien zur Auswahl, z. B. Ebss, Eagle , MEM, rpmll640, DMEM usw.
2. Andere zugesetzte Zutaten
Zusätzlich zu den Grundnährstoffen, die von verschiedenen synthetischen Medien bereitgestellt werden, sollten andere Komponenten wie Serum und Faktoren je nach unterschiedlichen Zellen und unterschiedlichen Kulturzwecken hinzugefügt werden.
Serum liefert wichtige Substanzen wie extrazelluläre Matrix, Wachstumsfaktor und Transferrin, und häufig wird fötales Rinderserum verwendet. Der Anteil des zugesetzten Serums sollte entsprechend unterschiedlichen Zellen und unterschiedlichen Forschungszwecken bestimmt werden. 10 % ~ 20 % Serum kann das schnelle Wachstum und die Proliferation von Zellen aufrechterhalten, was als Wachstumsmedium bezeichnet wird; Um das langsame Wachstum oder die Unsterblichkeit der Zellen aufrechtzuerhalten, können 2 % - 5 % Serum hinzugefügt werden, das als Erhaltungskulturmedium bezeichnet wird. Es gibt jedoch auch Substanzen, die für das Zellwachstum und die Reproduktion im Serum schädlich sind, wie Komplement, Immunglobulin und einige wachstumshemmende Faktoren; Die Zusammensetzung ist nicht klar, was die Analyse der Ergebnisse beeinflusst; Die Serumaktivität verschiedener Tiere und verschiedener Chargen ist unterschiedlich, was sich auf die Stabilität des Kultureffekts auswirkt.
Glutamin ist eine wichtige Stickstoffquelle für das Zellwachstum und spielt eine wichtige Rolle im Prozess des Zellwachstums und des Stoffwechsels. Glutamin ist jedoch in Lösung sehr instabil und wird leicht abgebaut. Es kann nach 7 Tagen bei 4 ° C zu etwa 50 % abgebaut werden, daher muss Glutamin vor der Verwendung hinzugefügt werden.
Um einer Kontamination vorzubeugen, sollte dem Kulturmedium eine gewisse Menge an Antibiotika zugesetzt werden.