Tierische Zellkultur und ihre technologische Entwicklung bei der Herstellung viraler Impfstoffe
Impfstoff ist ein automatischer Immunwirkstoff zur Vorbeugung von Infektionskrankheiten, der aus krankheitserregenden Mikroorganismen (wie Bakterien, Viren etc.) und deren Stoffwechselprodukten durch künstliche Virusreduktion, Inaktivierung oder Gentechnik hergestellt wird. Entsprechend den verschiedenen Arten von Erregern von Infektionskrankheiten, die es verhindert, kann es grob in bakterielle Impfstoffe und virale Impfstoffe unterteilt werden. Viele virale Impfstoffe, die in der Bevölkerung verwendet werden, müssen jetzt durch das Verfahren der Viruskultur, Reinigung, Konzentration, Inaktivierung oder Lyse hergestellt werden. Da Virosomen eine Art parasitäre Mikroorganismen sind, die auf Wirtszellen spezialisiert sind, muss ihre Vermehrung in ihren spezifischen Wirtszellen erfolgen. Deswegen,
1 allgemeiner Prozess der tierischen Zellkultur
Tierische Zellkultur bezieht sich auf die Kultivierung lebender tierischer Zellpopulationen in vitro. Gegenwärtig werden viele Bereiche der Biotechnologie diese Technologie verwenden. Gerade im Bereich der Medizin hat die Zellkultur eine besondere Rolle und Bedeutung. Beispielsweise werden viele Impfstoffe oder gentechnisch hergestellte Medikamente durch Zellkulturen im Forschungs- und Produktionsprozess hergestellt. Zu den häufig verwendeten Instrumenten und Geräten für Tierzellkulturen gehören aseptische Räume, ultrareine Werkbänke, Niedertemperaturkühlschränke, pH-Meter, Druckdampfsterilisatoren, elektrothermische Inkubatoren mit konstanter Temperatur, Kulturapparate, CO2-Inkubatoren, Wasserbadgefäße mit konstanter Temperatur, inverses Mikroskop und Zentrifugen , Sterilfilter, Waschvorrichtung, Zellzählbrett und elektronisches Zelltechnologieinstrument usw., Die cfam-Zellkulturautomatisierungsausrüstung von Shenyang GREAT ELITES Intelligent Equipment Co., Ltd. kann die Verdopplung der Zellkultur realisieren, und die Sauberkeit kann die GMP-Klasse A erreichen. Es eignet sich für Unternehmen, die eine große Anzahl kultivierter Zellen benötigen. Die Zellkultur kann in primäre Zellkultur und Subkultur-Zellkultur unterteilt werden.
1.1 primäre Zellkultur
Die primäre Zellkultur ist ein Prozess, bei dem verschiedene Gewebe des Tierkörpers aus dem Körper entnommen, mit verschiedenen Enzymen (üblicherweise verwendetes Trypsin), Chelatbildnern (üblicherweise verwendetes EDTA) oder mechanischen Methoden behandelt, in einzelne Zellen dispergiert und darin kultiviert werden ein geeignetes Medium, damit die Zellen überleben, wachsen und sich vermehren können.
Allerdings gibt es auch einige Mängel in der primären Zellkultur, wie z. B. mögliche exogene Faktoren, fehlende Überprüfung der Standardisierung im Voraus und große Unterschiede zwischen den Chargen aufgrund des Einflusses von Alter und Gesundheitszustand des Spenders. Daher ist die Verwendung stabiler Passagezellen zur Kultivierung dieser Viren anstelle von Primärzellen die zukünftige Entwicklungsrichtung geworden.
1.2 Subkultur Zellkultur
In der Subkultur, wenn die Primärkultur erfolgreich ist, tritt mit der Verlängerung der Kulturzeit und der kontinuierlichen Teilung der Zellen eine Kontakthemmung aufgrund des Kontakts zwischen den Zellen auf, und die Wachstumsrate verlangsamt sich oder stoppt sogar; Andererseits ist es auch wachstumsschädlich oder vergiftet durch unzureichende Nährstoffe und Metabolitenansammlungen. Zu diesem Zeitpunkt ist es notwendig, die Kultur in kleine Teile zu teilen und sie in ein anderes Kulturgefäß (Flasche) für die Kultur zu inokulieren. Dieser Vorgang wird als Subkultur oder Rekultur bezeichnet. Für Monolayerkulturen sind 80 % konfluente oder neu konfluente Zellen das ideale Subkulturstadium. Die Subkultur-Zellkultur in der Impfstoffproduktion bezieht sich auf den Prozess der Kultivierung stabiler Zelllinien, der Entnahme der für die Produktion vorgesehenen kryokonservierten Zelllinien und deren Kultivierung nach der Zellwiederbelebung.