Was sind die üblicherweise verwendeten Geräte für die Zellkultur?

Was sind die üblicherweise verwendeten Geräte für die Zellkultur?

19-09-2022

1. Ultra saubere Werkbank




Derzeit verwendet die überwiegende Mehrheit der Zelllabore ultrareine Werkbänke, um einen aseptischen Betrieb mit einfacher Bedienung, bequemer Installation, geringem Platzbedarf und guter Reinigungswirkung zu erreichen. Anhui Renhe Purification führt zwei Haupttypen von superreinen Werkbänken ein – Seitenströmungstyp (vertikaler Typ) und Ausflusstyp (horizontaler Laminarströmungstyp). Das Arbeitsprinzip besteht im Allgemeinen darin, dass die Raumluft zunächst durch den Grobfilter gefiltert, durch den Zentrifugalventilator in die statische Druckbox gepresst und dann durch den Hochleistungsluftfilter fein gefiltert wird. Der entstehende Reinluftstrom durchströmt den Sterilbereich mit einer bestimmten gleichmäßigen Teilwindgeschwindigkeit und bildet so eine staubfreie und sterile Arbeitsumgebung mit hoher Sauberkeit.




(1) Seitenstrom-Arbeitstisch: Der Luftstrom nach der Luftreinigung strömt von links oder rechts zur gegenüberliegenden Seite durch den Arbeitstisch oder von oben nach unten oder von unten nach oben und bildet eine Luftstrombarriere, um den Arbeitsbereich steril zu halten. Die Arbeitstischstruktur ist geschlossen;




(2) Ausblasarbeitstisch: Die gereinigte Luft strömt zum Bediener, sodass der Fremdluftstrom nicht in den Betrieb eingemischt wird. Die Arbeitstischstruktur ist offen, aber der experimentelle Betrieb von Schadstoffen ist für den Bediener ungünstig. Der Ultra-Clean-Arbeitstisch sollte regelmäßig von den zuständigen Abteilungen auf Sauberkeit überprüft werden. Die Sauberkeit des ultrareinen Arbeitstisches, der die Anforderungen erfüllt, sollte Grad 100 erreichen, und die Partikelgröße sollte mit einem Staubpartikelzähler ≤ 5 μ getestet werden. Die Anzahl der Staubpartikel in m darf 3,5/L nicht überschreiten; Der Luftstrom muss innerhalb von 0,75-1,0 m3/s geregelt werden; Die durchschnittliche Anzahl von Bakterienkolonien beträgt weniger als 1, und der Filter muss bei Bedarf entsprechend der Sterilität ausgetauscht werden.




2. Mikroskop




Das inverse Mikroskop ist eine notwendige Ausrüstung für die tägliche Arbeit des Zellkulturlabors, das hauptsächlich zum täglichen Verständnis des Zellwachstums und zur Beobachtung von Verschmutzungen verwendet wird. Wenn es die finanziellen Mittel zulassen, empfiehlt sich die Verwendung eines hochwertigen Phasenkontrastmikroskops, Anatomiemikroskops, Fluoreszenzmikroskops, Videoaufzeichnungssystems oder Zeitrafferfilmaufnahmegeräts, das mit einem fotografischen System ausgestattet ist, um jederzeit Bilder zu machen und das Zellwachstum aufzuzeichnen.




3. Inkubator




Wie Zellen in vivo müssen in vitro kultivierte Zellen bei einer konstanten Temperatur überleben. Im Allgemeinen beträgt die optimale Wachstumstemperatur 37 ℃ und die Temperaturdifferenz sollte ± 0,5 ℃ nicht überschreiten. Wenn die Temperatur um 2 ℃ ansteigt, wird es für das Überleben der Zellen ungünstig, und die Zellen sterben bald ab, wenn die Temperatur über 40 ℃ steigt. Daher sind thermostatische Inkubatoren und CO2-Inkubatoren, die die Temperatur genau regeln können, die beste Wahl.




(1) Inkubator mit konstanter Temperatur: Es muss ein wasserdichter oder Transistor-Inkubator mit automatischer Temperaturregelung ausgewählt werden, der eine hohe Empfindlichkeit und eine stabile Temperaturregelung aufweist. Der allgemeine Thermostat-Inkubator ist billiger, hat aber den Nachteil, dass er nur für die geschlossene Kultivierung geeignet ist.




(2) CO2-Inkubator: Derzeit sind die meisten Zellkulturräume weit verbreitet. Der Vorteil des CO2-Inkubators besteht darin, dass er eine bestimmte Menge CO2 bereitstellen kann (die übliche Konzentration beträgt 5 %), die für die Zellkultur erforderlich ist, und dass der pH-Wert des Kulturmediums, das für offene oder halboffene geeignet ist, leicht stabilisiert werden kann Kultur. Um das Innere der Kulturflasche bei Verwendung der Kulturflasche mit der Außenwelt belüftet zu halten, kann der Flaschenverschluss leicht gelockert werden. Um eine Zellverschmutzung zu vermeiden, muss bei dieser Kulturmethode die Luft in der Kulturbox sauber gehalten und regelmäßig mit UV-Strahlung oder Alkohol desinfiziert werden. Gleichzeitig sollte der Tank mit sterilem destilliertem Wasser in die Kulturbox gestellt werden, um das Verdunsten der Kulturlösung zu verhindern.




(3) Verbrauchsmaterialien für Zellkulturen: Kulturschalen, Platten oder Flaschen können zur Zellkultur verwendet werden.




4. Ofen (Trockenofen)




Einige Instrumente und Gefäße, die für die Zellkultur verwendet werden, müssen vor Gebrauch getrocknet werden, und Glaswaren müssen mit trockener Hitze sterilisiert werden. Während der Desinfektion mit trockener Hitze sollte die Temperatur im Ofen im Allgemeinen mehr als 160 ℃ erreichen, und normalerweise wird der Luftstoßofen verwendet. Seine Vorteile sind eine gleichmäßige Temperatur und gute Wirkung, während seine Nachteile ein langsamer Erwärmungsprozess sind. Beim Aufheizen darf vor dem Anblasen nicht aufgeheizt werden, aber Anblasen und Aufheizen sollten gleichzeitig beginnen. Wenn die Temperatur 100 ℃ erreicht, sollte das Blasen gestoppt werden. Es sollte darauf geachtet werden, dass das Papier oder die Baumwolle, mit denen die Utensilien umwickelt sind, nicht verbrennen. Die verbrannten Trümmer können das Wachstum von Zellen beeinträchtigen. Nach der Desinfektion kann die Boxtür nicht sofort geöffnet werden, um Glasbruch durch plötzliche Abkühlung zu vermeiden.




5. Wasserreinigungsgerät




Die Wasserqualität für die Zellkultur ist hoch. Das Wasser zur Vorbereitung von Zellkulturen, zellkulturbezogene Flüssigkeiten und Wasser zur Reinigung von Zellkulturutensilien müssen vorher streng gereinigt werden. Gegenwärtig gibt es eine Vielzahl von Reinigungsverfahren, die kombiniert werden, um die Verwendung von Reinwasservorrichtungen, die gewöhnliches Wasser in reines Wasser und ultrareines Wasser reinigen können, sehr flexibel und bequem zu machen. Sie können an der Wand montiert, auf dem Tisch montiert, mit Wasserspeichertanks ausgestattet oder direkt mit einer Flüssigkeitstrennpistole verwendet werden. Sie können auch mit Sterilisationsfunktionen entsprechend den Anforderungen verschiedener Arten von Versuchswasser konfiguriert werden, wodurch DNA-Enzyme, RNA-Enzyme, Proteasen usw. effektiv entfernt werden, sowie Ultrafiltrations-Reinwassergeräte, die Wärmequellen und Endotoxin effektiv entfernen können.




6. Kühlschrank




Die notwendige Ausrüstung des Zellkulturlabors muss zweckbestimmt sein und darf keine flüchtigen, entzündlichen und anderen zellschädigenden Substanzen lagern und muss sauber gehalten werden. Im Allgemeinen umfasst es gewöhnliche Kühlschränke, Niedrigtemperaturkühlschränke und Ultratieftemperaturkühlschränke.




Gewöhnlicher Kühlschrank: Er kann Kulturflüssigkeit, normale Kochsalzlösung, Hanks-Flüssigkeitsreagenz und andere Kulturartikel lagern und Gewebeproben für kurze Zeit lagern.




-20 ℃ Niedertemperaturkühlschrank und Ultratieftemperaturkühlschrank: Zur Aufbewahrung von Präparaten, die eingefroren werden müssen, um die biologische Aktivität aufrechtzuerhalten, und die lange gelagert werden müssen, wie Enzyme, Serum usw.




7. Zellkryostat




Die üblicherweise im Reservoir verwendeten Flüssigstickstoffbehälter können je nach Verwendungsbedarf in verschiedene Typen und Spezifikationen unterteilt werden. Bei der Auswahl eines Flüssigstickstoffbehälters müssen drei Faktoren berücksichtigt werden: Volumengröße, einfacher Zugang und einfache Verwendung sowie Verflüchtigung von Flüssigstickstoff. Die Größe des Flüssigstickstoffbehälters beträgt im Allgemeinen 25-500 l, was etwa 250-15000 1-ml-Kryoröhrchen aufnehmen kann. Die niedrigste Temperatur von flüssigem Stickstoff kann - 196 ℃ erreichen, also achten Sie darauf, Erfrierungen bei der Verwendung zu vermeiden. Da flüssiger Stickstoff flüchtig ist, ist es notwendig, die Menge des verbleibenden flüssigen Stickstoffs zu beobachten und rechtzeitig zu ergänzen, um Zellschäden oder Zelltod aufgrund von zu wenig flüssigem Stickstoff zu vermeiden. Derzeit stehen viele intelligente Behälter zur Kryokonservierung von Zellen zur Auswahl. Flüssigstickstoffbehälter, die mit elektronischen Steuerungen ausgestattet sind, können eine automatische Kryokonservierung realisieren; Der Flüssigstickstoffpegel und die Probentemperatur können überwacht werden, um sicherzustellen, dass die Probentemperatur immer den eingestellten Temperaturpunkt erreicht; Das Alarmsystem kann so konfiguriert werden, dass es im Falle von Flüssigstickstoffpegel, Temperatur, Batterie, Spannung, Stromversorgung und anderen Anomalien alarmiert; Gleichzeitig ist ein Heißgas-Bypass-System vorgesehen, um zu verhindern, dass warme Luft von mehr als -130 ° C in den Flüssigstickstofftank eindringt, um die Probe effektiver zu schützen und einen Temperaturanstieg im Behälter zu verhindern. Darüber hinaus kann der Vorratstank für flüssigen Stickstoff ausgewählt werden, um flüssigen Stickstoff zum Vorratstank durch das Verbindungsrohr zu ergänzen, um die Probensicherheit zu gewährleisten. Der Flüssigstickstoffpegel und die Probentemperatur können überwacht werden, um sicherzustellen, dass die Probentemperatur immer den eingestellten Temperaturpunkt erreicht; Das Alarmsystem kann so konfiguriert werden, dass es im Falle von Flüssigstickstoffpegel, Temperatur, Batterie, Spannung, Stromversorgung und anderen Anomalien alarmiert; Gleichzeitig ist ein Heißgas-Bypass-System vorgesehen, um zu verhindern, dass warme Luft von mehr als -130 ° C in den Flüssigstickstofftank eindringt, um die Probe effektiver zu schützen und einen Temperaturanstieg im Behälter zu verhindern. Darüber hinaus kann der Vorratstank für flüssigen Stickstoff ausgewählt werden, um flüssigen Stickstoff zum Vorratstank durch das Verbindungsrohr zu ergänzen, um die Probensicherheit zu gewährleisten. Der Füllstand des flüssigen Stickstoffs und die Probentemperatur können überwacht werden, um sicherzustellen, dass die Probentemperatur immer dem eingestellten Temperaturpunkt entspricht; Das Alarmsystem kann so konfiguriert werden, dass es im Falle von Flüssigstickstoffpegel, Temperatur, Batterie, Spannung, Stromversorgung und anderen Anomalien alarmiert; Gleichzeitig ist ein Heißgas-Bypass-System vorgesehen, um zu verhindern, dass warme Luft von mehr als -130 ° C in den Flüssigstickstofftank eindringt, um die Probe effektiver zu schützen und einen Temperaturanstieg im Behälter zu verhindern. Darüber hinaus kann der Vorratstank für flüssigen Stickstoff ausgewählt werden, um flüssigen Stickstoff zum Vorratstank durch das Verbindungsrohr zu ergänzen, um die Probensicherheit zu gewährleisten. Das Alarmsystem kann so konfiguriert werden, dass es im Falle von Flüssigstickstoffpegel, Temperatur, Batterie, Spannung, Stromversorgung und anderen Anomalien alarmiert; Gleichzeitig ist ein Heißgas-Bypass-System vorgesehen, um zu verhindern, dass warme Luft von mehr als -130 ° C in den Flüssigstickstofftank eindringt, um die Probe effektiver zu schützen und einen Temperaturanstieg im Behälter zu verhindern. Darüber hinaus kann der Vorratstank für flüssigen Stickstoff ausgewählt werden, um flüssigen Stickstoff zum Vorratstank durch das Verbindungsrohr zu ergänzen, um die Probensicherheit zu gewährleisten. Das Alarmsystem kann so konfiguriert werden, dass es im Falle von Flüssigstickstoffpegel, Temperatur, Batterie, Spannung, Stromversorgung und anderen Anomalien alarmiert; Gleichzeitig ist ein Heißgas-Bypass-System vorgesehen, um zu verhindern, dass warme Luft von mehr als -130 ° C in den Flüssigstickstofftank eindringt, um die Probe effektiver zu schützen und einen Temperaturanstieg im Behälter zu verhindern. Darüber hinaus kann der Vorratstank für flüssigen Stickstoff ausgewählt werden, um flüssigen Stickstoff zum Vorratstank durch das Verbindungsrohr zu ergänzen, um die Probensicherheit zu gewährleisten.




8. Zentrifugieren




In der Zellkultur wird die Zentrifugation normalerweise verwendet, um eine Zellsuspension herzustellen, die Zelldichte einzustellen, Zellen zu waschen und zu sammeln. Desktop-Zentrifuge mit 4000 U/min ist im Allgemeinen konfiguriert; Für die Zellsedimentation ist eine Zentrifugalkraft von 80-100 G erforderlich, da eine übermäßige Zentrifugalkraft die Zellen schädigt. Je nach Anforderung stehen Zentrifugen mit großer Kapazität und einstellbarer Temperatur, Hochgeschwindigkeitszentrifugen, Niedertemperatur-Gefrierzentrifugen und andere funktionalere Zentrifugen zur Auswahl.




9. Gleichgewicht




Üblicherweise werden Präzisionswaagen und Analysenwaagen verwendet. Die Genauigkeit der Analysenwaage beträgt im Allgemeinen 0,1 mg, 0,01 mg und 0,001 mg. Im Allgemeinen wird eine geeignete Waage entsprechend dem Probenahmevolumen und den Genauigkeitsanforderungen ausgewählt: eine Waage mit einer Genauigkeit von 0,1 mg sollte ausgewählt werden, wenn das Probenahmevolumen größer als 100 mg ist; Die Probenmenge beträgt 100–10 mg, und es wird eine Waage mit einer Genauigkeit von 0,01 mg ausgewählt; Für das Probenahmevolumen von 10 mg sollte eine Waage mit einer Genauigkeit von 0,001 mg gewählt werden. Die Waage muss regelmäßig kalibriert werden. Die Waage mit automatischer Kalibrierfunktion kann für eine einfache Wartung ausgewählt werden. Achten Sie bei der Verwendung der Waage auf Sauberkeit und vermeiden Sie den direkten Kontakt von ätzenden Pulvern und Flüssigkeiten mit der Wägeplattform.


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