Das Kulturmedium wird nach Verwendung klassifiziert
Je nach Verwendungszweck kann das Kulturmedium in Basiskulturmedium, Nährkulturmedium, Anreicherungskulturmedium, selektives Kulturmedium, Identifikationskulturmedium, anaerobes Kulturmedium usw. unterteilt werden.
1. Basische Medien sind die Nahrungsgrundlage, die von den meisten Mikroorganismen allgemein benötigt wird. Wenn ein Mikroorganismus besondere Bedürfnisse hat, kann er auf dieser Basis einige Zutaten hinzufügen, wie z. B. Peptonwasser, Bouillon-Kulturmedium, Nähragar usw. 1% Pepton-Wasser-Medium ist das einfachste Basismedium. Dieses Basismedium kann für allgemeine Bakterienanreicherungskulturen und Indigo-Substrattests verwendet werden. Wenn Indikatoren und Zucker hinzugefügt werden, wird es zu einem Zuckerfermentationsmedium für den Zuckerfermentationstest verarbeitet und wird zu einem Identifikationsmedium; Erhöht man die Kochsalzdosierung im 1 % Peptonwasser und erhöht den pH-Wert auf ca. 8,6, wird daraus basisches Peptonwasser für die Anreicherungskultur von Vibrio cholerae und ein spezielles Anreicherungsmedium.
2. Nährmedien fügen dem Basiskulturmedium einige spezielle Nährstoffe wie Glukose, Blut, Serum, Hefeextrakt, Wachstumsfaktoren usw. hinzu, damit Bakterien mit hohem Nährstoffbedarf darin wachsen können. Streptococcus pneumoniae usw. müssen in einem Medium wachsen, das Blut oder Serum enthält; Dem Kulturmedium von Mycobacterium tuberculosis müssen Eier, Kartoffeln, Glycerin usw. zugesetzt werden. Das am häufigsten verwendete Nährmedium ist die Blutagarplatte.
3. Anreicherungsmedien sind im Allgemeinen flüssige Medien, die für die Anreicherungskultur von Bakterien verwendet werden. Es kann weit oder speziell verwendet werden. Die speziellen Anreicherungsmedien enthalten häufig spezielle Nährstoffe oder Wachstumsfaktoren, die für das Wachstum der Zielbakterien erforderlich sind.
4. Selektive Medien: Die selektiven Medien enthalten Nährstoffe (Bakterizide) und bakteriostatische Mittel (Selektoren). Nachdem die Probe in solchen Medien inokuliert wurde, werden Nicht-Zielbakterien aufgrund der selektiven Hemmung bakteriostatischer Mittel in unterschiedlichem Maße gehemmt, was der Proliferation oder Trennung von Zielbakterien förderlicher ist. Die positive Nachweisrate der Zielbakterien kann verbessert werden, indem das Selektivmedium für einen bestimmten Zeitraum verwendet und dann in das Selektividentifikationsmedium eingeimpft wird. Es gibt viele Arten von bakteriostatischen Mitteln, wie Malachitgrün, Brillantgrün, Natriumselenit, Natriumdesoxycholat, Gallensalz, Natriumtetrasulfidsulfonat und verschiedene Antibiotika. Die Zugabemenge an bakteriostatischen Mitteln sollte angemessen und genau sein. Einige sind hochgiftig und einige sind nicht resistent gegen hohes Fieber. Besonderes Augenmerk sollte auf die Zubereitung gelegt werden.
5. Differentialmedien sind ein Reaktionssubstrat und Indikator, der dem Kulturmedium zugesetzt wird, um die Eigenschaften bestimmter Mikroorganismen zu unterscheiden und zu identifizieren. Es kann in allgemeine Identifikationsmedien und selektive Identifikationsmedien unterteilt werden. Das Medium, das nur zur Unterscheidung verschiedener mikrobieller Arten verwendet wird, wird als allgemeines Identifizierungsmedium bezeichnet. Im Allgemeinen fügt diese Art von Medium keine bakteriostatischen Mittel hinzu, sondern enthält nur Indikatoren, wie z. B. Kirschners Bisaccharid-Eisenmedium, das Glucose und Lactose enthält. Phenolrot dient als Indikator zur Beobachtung des Farbumschlags des Kultursubstrats und der geneigten Oberfläche zur Bestimmung der Fermentationsfähigkeit von Bakterien zu Glucose und Lactose. Eisenammoniumcitrat hinzufügen, Nach der Kultivierung, Beobachten Sie, ob schwarze Ablagerungen vorhanden sind, um festzustellen, ob die Bakterien die schwefelhaltigen Aminosäuren in Pepton zersetzen, um Schwefelwasserstoff zu erzeugen. Ein weiteres Beispiel ist Eosin-Methylenblau-Agar, das Lactose (Reaktionssubstrat) und Eosin-Methylenblau (Indikator) enthält, um Escherichia coli, darmpathogene Bakterien und andere verschiedene Bakterien zu identifizieren. Das allgemeine Identifizierungsmedium ist dadurch gekennzeichnet, dass es Indikatoren in der Formel enthält, und kann verwendet werden, um verschiedene Arten von Mikroorganismen zu unterscheiden. Einige Identifizierungsmedien können auch als spezielle Bakterien verwendet werden, um bestimmte Bakterien zu isolieren und zu kultivieren, wie z. B. Trypton-Sojabohnen-Agar und schokoladenfarbener Blut-Agar. das Lactose (Reaktionssubstrat) und Eosin-Methylenblau (Indikator) enthält, um Escherichia coli, darmpathogene Bakterien und andere verschiedene Bakterien zu identifizieren. Das allgemeine Identifizierungsmedium ist dadurch gekennzeichnet, dass es Indikatoren in der Formel enthält, und kann verwendet werden, um verschiedene Arten von Mikroorganismen zu unterscheiden. Einige Identifizierungsmedien können auch als spezielle Bakterien verwendet werden, um bestimmte Bakterien zu isolieren und zu kultivieren, wie z. B. Trypton-Sojabohnen-Agar und schokoladenfarbener Blut-Agar. das Lactose (Reaktionssubstrat) und Eosin-Methylenblau (Indikator) enthält, um Escherichia coli, darmpathogene Bakterien und andere verschiedene Bakterien zu identifizieren. Das allgemeine Identifizierungsmedium ist dadurch gekennzeichnet, dass es Indikatoren in der Formel enthält, und kann verwendet werden, um verschiedene Arten von Mikroorganismen zu unterscheiden. Einige Identifizierungsmedien können auch als spezielle Bakterien verwendet werden, um bestimmte Bakterien zu isolieren und zu kultivieren, wie z. B. Trypton-Sojabohnen-Agar und schokoladenfarbener Blut-Agar.
Einige Inhibitoren und Indikatoren werden dem Kulturmedium zugesetzt, um das Wachstum einiger Bakterien zu hemmen, die Vermehrung der Zielbakterien zu fördern und den wachsenden Bakterienkolonien bestimmte Eigenschaften zu verleihen, um die Identifizierung und Selektion zu erleichtern. Diese Art von Kulturmedium wird als selektives Identifikationsmedium bezeichnet. Beispielsweise enthält SS-Agar Lactose (Reaktionssubstrat), Neutralrot, Eisen(III)-Ammoniumcitrat (Indikator), Brillantgrün und Gallensalz (bakteriostatisches Mittel) in der mittleren Formel. Bakteriostatische Mittel wie Brillantgrün und Gallensalz können das Wachstum von grampositiven Bakterien und einigen Escherichia coli hemmen, haben aber keine Wirkung auf Salmonellen und Shigellen. Außerdem kann Escherichia coli Laktose fermentieren, um Säure zu produzieren, wodurch die Kolonien rot werden. Salmonellen und Shigellen fermentieren keine Laktose, und ihre Kolonien sind farblos. Wenn die Bakterien Schwefelwasserstoff produzieren, reagiert es mit Eisen(III)-Ammoniumcitrat, um eine Eisen(II)-Sulfid-Präzipitation zu bilden, und das Koloniezentrum ist schwarz oder braun. Um den Zweck der Identifizierung zu erreichen.
In den letzten Jahren wurden im In- und Ausland spezielle Farbentwicklungsmedien für einige Bakterien entwickelt, indem die spezifischen Enzyme einiger Bakterien verwendet und die entsprechenden Substrate ausgewählt wurden. Es wurde zur Isolierung und Identifizierung von Bakterien verwendet und hat gute Ergebnisse erzielt. Dieses Farbentwicklungsmedium ist eigentlich auch das Identifikationsmedium. Das Grundprinzip besteht darin, die Kombination aus Chromogen (oder Fluorogen) und Bakterienwirkungssubstrat in das Kulturmedium zu geben, und wenn die Bakterien entsprechende Enzyme enthalten, wird die Kombination zersetzt, um Farbe zu entwickeln (oder Fluoreszenz zu zeigen). Beispielsweise wird das Chromogen-Glycosid-Konjugat unter der Wirkung von Glycosidase zersetzt, um das Glycosid von dem Chromogen zu trennen und die Farbe anzuzeigen; Fluoreszierende Aminosäurekonjugate (keine Fluoreszenz) zeigen Fluoreszenz, indem sie unter der Wirkung von Aminopeptidase Aminosäuren von fluoreszierenden Substanzen trennen. Übliche Chromogene für die Farbentwicklung sind: α-Naphthol β-Naphthol, o-Nitrophenol, p-Nitrophenol, p-Nitroanilin, Phenolphthalein, 2-Amino, 4-Nitrobenzol usw.; Häufig verwendete Fluorophore umfassen 4-Methylumbelliferon (auch bekannt als 7-Hydroxy-4-methylcumarin) und so weiter. Gegenwärtig wird das Farbentwicklungsmedium zur Isolierung, Identifizierung und Kultivierung einer Vielzahl von Bakterien oder Pilzen, wie Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans und anderen Farbentwicklungsmedien verwendet. α-Naphthol β-Naphthol, o-Nitrophenol, p-Nitrophenol, p-Nitroanilin, Phenolphthalein, 2-Amino, 4-Nitrobenzol usw.; Häufig verwendete Fluorophore umfassen 4-Methylumbelliferon (auch bekannt als 7-Hydroxy-4-methylcumarin) und so weiter. Gegenwärtig wird das Farbentwicklungsmedium zur Isolierung, Identifizierung und Kultivierung einer Vielzahl von Bakterien oder Pilzen, wie Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans und anderen Farbentwicklungsmedien verwendet. α-Naphthol β-Naphthol, o-Nitrophenol, p-Nitrophenol, p-Nitroanilin, Phenolphthalein, 2-Amino, 4-Nitrobenzol usw.; Häufig verwendete Fluorophore umfassen 4-Methylumbelliferon (auch bekannt als 7-Hydroxy-4-methylcumarin) und so weiter. Gegenwärtig wird das Farbentwicklungsmedium zur Isolierung, Identifizierung und Kultivierung einer Vielzahl von Bakterien oder Pilzen, wie Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans und anderen Farbentwicklungsmedien verwendet.
Es gibt auch einige Identifizierungsmedien, die verschiedene Enzymsysteme verwenden, die für Bakterien einzigartig sind, um verschiedene spezifische Zucker, Alkohole, Aminosäuren oder andere Substrate zu zersetzen und zu verwenden, um Säuren, Gase, Laugen oder andere sichtbare Substanzen zu produzieren, um Bakterien zu identifizieren, wie z verwendeten biochemischen Medien.
Das für den biochemischen Merkmalstest von Bakterien verwendete Nährmedium ist dadurch gekennzeichnet, dass dem zuckerfreien Basiskulturmedium ein spezifisches Substrat und ein Indikator zugesetzt werden. Eine Reihe biochemischer Reaktionsergebnisse von Bakterien in einem solchen Kulturmedium werden schließlich durch den Indikator angezeigt. Diese Art von Medium ist ein Medium zur Identifizierung biochemischer Reaktionen. Je nach Dosierung kann es in biochemisches Hauptmedium und biochemisches Nebenmedium unterteilt werden. Es ist erwähnenswert, dass einige Komponenten des biochemischen Testmediums von vielen Faktoren wie hoher Temperatur und pH-Wert beeinflusst werden. Bei der Zubereitung und Verwendung sollte es entsprechend der tatsächlichen Situation streng kontrolliert werden, um zu verhindern, dass die wirksamen Komponenten beschädigt werden, um den Gebrauchseffekt sicherzustellen.
6. Anaerobe Medien sind ein Medium zur Isolierung, Kultivierung und Identifizierung anaerober Bakterien, das als anaerobe Medien bezeichnet wird. Aufgrund des Fehlens verschiedener für den aeroben Stoffwechsel notwendiger Enzyme wie Cytochrom und Cytochromoxidase, Katalase und Peroxidase sowie Superoxiddismutase sind Anaerobier aufgrund ihrer eigenen Stoffwechseldefekte nicht in der Lage, einen aeroben Stoffwechsel durchzuführen, und die durch anaerobe Fermentation erzeugte Energie ist es unzureichend. Daher können Anaerobier in einer normalen atmosphärischen Umgebung nicht wachsen und überleben. Damit anaerobe Bakterien normal wachsen können, muss ein spezielles Medium mit reichhaltigen Nährstoffen, niedrigem Redoxpotential und speziellen Wachstumsfaktoren hergestellt werden.
Anaerobes Kulturmedium wird normalerweise aus Herz-, Gehirn- oder anderen Organextrakten hergestellt, und es ist oft notwendig, Natriumthioglykolat, Cystein, Fleischreste, reduziertes Eisen, Aktivkohle und andere Reduktionsmittel oder Desoxidationsmaterialien hinzuzufügen. Um den Sauerstoffgehalt des Nährbodens zu beobachten, kann dem flüssigen Nährboden auch Azurol oder Methylenblau als Redoxindikator zugesetzt werden. Herz, Hirnextrakt, Lebermasse und Fleischreste enthalten ungesättigte Fettsäuren, die im Nährmedium Sauerstoff aufnehmen können. Natriumthioglykolat und Cystein sind starke Reduktionsmittel, die im Kulturmedium gelösten Sauerstoff verbrauchen können. Trockene Aktivkohle und Saugwatte können ebenfalls Sauerstoff im Kulturmedium aufnehmen. Deswegen, Der Zweck der Zugabe von Reduktionsmittel und absorbierendem Material zum Kulturmedium besteht darin, eine anoxische Umgebung des Kulturmediums zu schaffen und ein niedriges Redoxpotential aufrechtzuerhalten. Zusätzlich kann eine Schicht aus flüssigem Paraffin auf die Oberfläche des Kulturmediums aufgebracht werden, um den Kontakt zwischen dem Kulturmedium und der Atmosphäre zu isolieren.
7. Kulturzellflüssigkeit (LCL) bezieht sich auf die Flüssigkeit, die zum Kultivieren, Konservieren und Transportieren lebender Gewebe, Organe und Zellen in vitro für verschiedene Zwecke verwendet wird. Im Wesentlichen handelt es sich um eine Nährstoffumgebung, die das Wachstum in vivo künstlich simuliert, sodass Zellen in dieser Umgebung wachsen und sich vermehren können. Da die Anzahl seiner Komponenten klar ist und verschiedene biologische Veränderungen des untersuchten Objekts durch Regulierung einer bestimmten Komponente beobachtet werden können, wird es in der Forschung der Zellbiologie häufig verwendet. Die Bestandteile der Zellkulturlösung umfassen hauptsächlich Wasser, Aminosäuren, Vitamine, Kohlenhydrate, anorganische Ionen, Wachstumsfaktoren usw. Diese Bestandteile müssen streng ausgewählt und getestet werden, bevor sie verwendet werden können. Das verwendete Wasser muss den Anforderungen an Testwasser der Klasse 2 (CB/T 6682-1992) entsprechen.