Einführung in Zellkultur-Instrumente und -Funktionen für den zellexperimentellen Technologieaustausch
Die Zusammensetzung von Zellen wird allgemein in vier Bereiche unterteilt: Vorbereitungsbereich, Vorbereitungsbereich, Lagerbereich und steriler Bereich.
Die Hauptfunktionen des Vorbereitungsbereichs sind Reinigung, Desinfektion und Vorbereitung; Der Vorbereitungsbereich dient hauptsächlich der Vorbereitung von Nährmedien und Reagenzien; Der Lagerbereich dient der Zellenbank und der Warenlagerung; Der Sterilbereich ist der Ort, an dem sich das Laborpersonal umkleidet, puffert und kultiviert. Der Prozess der Zellkultur kann entsprechend ihrer Funktionen in vier Teile unterteilt werden: Zellkultur, Lagerung, Präparation und Sterilisation.
1、 Zellkulturinstrument und Einführung
[1. Super saubere Werkbank]
Die Ultrareinbank mit vertikalem Durchfluss wird im Allgemeinen für die Zellkultur verwendet. Unter Überdruck tritt kein Gas aus. Es wird nur das Bedienobjekt geschützt, nicht jedoch das Personal und die Laborumgebung.
Ultraviolette Bestrahlung verwirklicht die Sterilisationsfunktion. UV-Sterilisation (Oberfläche) + Ozon-Sterilisation (tote Ecke, Schallwand geschlossen). Jede UV-Bestrahlung dauert 20-30min, und die Luft wird vor Gebrauch 10min geblasen (Achten Sie auf den Luftwechsel im Kulturraum). Die Sauberkeit erreicht Klasse 100.
Nach 3000 Stunden wird die Leistung der UV-Lampe auf 70 % der ursprünglichen Leistung reduziert. Tauschen Sie das grobe Filtertuch am Oberteil rechtzeitig aus und entfernen Sie es regelmäßig zur Reinigung.
[2. Biosicherheitswerkbank]
Unter Unterdruck tritt kein Gas aus, was nicht nur die Probe schützt, sondern auch den Bediener und die Umwelt schützt. Sekundäre Sicherheitszellen tragen Viren (wie Hele / KB), primäre kultivierte klinische Humanproben (Pilze), Experimente im Zusammenhang mit Lentiviren.
[3. CO2-Zylinder]
CO2-Flaschen werden hauptsächlich zur Speicherung von CO2-Gas verwendet. Bei der Zellkultur müssen die meisten Zellen unter der Bedingung durchgeführt werden, dass der CO2-Gehalt 5 % beträgt. Der CO2-Zylinder wird hauptsächlich zur stabilen Aufrechterhaltung des CO2-Gehalts an den Inkubator angeschlossen.
[4. Inverses Mikroskop]
Das inverse Mikroskop ist ein routinemäßig notwendiges Gerät in der täglichen Arbeit des Zellkulturlabors. Es wird hauptsächlich verwendet, um das Wachstum von Zellen zu verstehen und das Auftreten von Infektionen zu beobachten. Wenn es die finanziellen Mittel zulassen, empfiehlt sich die Wahl eines Phasenkontrastmikroskops, eines Anatomiemikroskops, eines Fluoreszenzmikroskops, eines Videoaufzeichnungssystems oder eines mit einem Kamerasystem ausgestatteten Zeitrafferfilmaufnahmegeräts, das das Zellwachstum beliebig aufnehmen und aufzeichnen kann Zeit.
[5. Tischzentrifuge]
Die Zentrifuge ist ein spezielles Instrument, das die Zentrifugalkraft nutzt, um gemischte Flüssigkeiten (mit Feststoffen) zu trennen und auszufällen. Es wird hauptsächlich verwendet, um eine Zellsuspension herzustellen, die Zelldichte anzupassen, Zellen zu waschen und zu sammeln. Die Zentrifugationsrate in der Zellkultur beträgt im Allgemeinen 300 × g (etwa 1000 U/min) für 5–10 Minuten. Eine zu hohe Rotationsgeschwindigkeit führt zum Zelltod. Je nach Bedarf stehen funktionellere Zentrifugen zur Auswahl, z. B. Zentrifugen mit großer Kapazität und einstellbarer Temperatur, Hochgeschwindigkeitszentrifugen und Niedertemperatur-Gefrierzentrifugen.
[6. CO2-Inkubator]
CO2 ist ein Stoffwechselprodukt von Zellen, ein wesentlicher Bestandteil des Zellwachstums und auch mit der Aufrechterhaltung des pH-Werts des Kulturmediums verbunden. In der Zellkultur sind O2 und CO2 notwendige Bedingungen für das Zellwachstum. CO2-Inkubatoren haben Trocken- und Nasstypen, und die Kulturbedingungen sind im Allgemeinen auf 37 ℃ und 5 % CO2 eingestellt. Eine Kontamination des Wassers in der Wasserschale des CO2-Inkubators wird durch steriles Wasser + regelmäßigen 2-wöchigen Austausch + Konservierungsmittel (0,02 % Natriumazid oder 2 % Kupfersulfat) verhindert.
[7. Zellzählplatte (Gerät)]
Der Zellzähler ist ein mikrocomputergesteuertes Zählinstrument, das Zählung, Statistik und Anzeige integriert. Es ist zuverlässig und bequem zu bedienen.
[8. Pipette]
Die Hauptfunktion der Pipette ist das Aufsaugen und Entfernen von Flüssigkeit wie Kulturmedium während der Zellkultur. Der in der Zellkultur verwendete Hauptmessbereich besteht aus 10 ul / 100 ul / 200 ul / 1000 ul.